【pbs缓冲液配方】PBS(Phosphate Buffered Saline)是一种常用的生物实验缓冲液,广泛应用于细胞培养、免疫检测、组织处理等领域。其主要作用是维持溶液的pH稳定,防止细胞或蛋白质在操作过程中受到破坏。以下是PBS缓冲液的常见配方及其使用说明。
一、PBS缓冲液的基本组成
PBS通常由以下几种成分组成:
- 磷酸盐:用于调节和维持pH值。
- 氯化钠:提供渗透压平衡。
- 氯化钾:协助维持离子平衡。
- 蒸馏水:作为溶剂。
根据不同的实验需求,PBS可以分为无钙镁型(DPBS)和含钙镁型(HBSS),前者常用于细胞清洗,后者适用于细胞培养。
二、常用PBS缓冲液配方表
| 成分 | 含量(g/L) | 说明 |
| NaCl | 8.0 g | 提供渗透压 |
| KCl | 0.2 g | 维持离子平衡 |
| Na₂HPO₄ | 1.44 g | 磷酸盐缓冲系统之一 |
| KH₂PO₄ | 0.24 g | 磷酸盐缓冲系统之一 |
| 蒸馏水 | 1 L | 溶剂 |
> 注意:以上为标准PBS的配方,pH约为7.4。实际配制时需用pH计调整至目标值,并进行高压灭菌。
三、PBS缓冲液的制备步骤
1. 称量:按照上述比例准确称取各成分。
2. 溶解:将所有成分加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 定容:加入蒸馏水至1L。
4. 调节pH:使用pH计测量,若pH偏离7.4,可用HCl或NaOH调节。
5. 灭菌:采用高压灭菌(121℃,15 psi,15分钟)或过滤除菌。
6. 储存:灭菌后置于4℃冰箱中保存,有效期一般为1-2周。
四、PBS的应用场景
| 应用场景 | 说明 |
| 细胞清洗 | 去除细胞表面杂质 |
| 免疫染色 | 作为洗涤液 |
| 组织切片 | 用于组织块的清洗 |
| 抗体稀释 | 作为抗体稀释液 |
| 细胞传代 | 用于细胞消化后的冲洗 |
五、注意事项
- 避免反复冻融,以免影响缓冲能力。
- 若用于细胞培养,建议使用无钙镁型PBS(DPBS)。
- 不同实验对PBS的要求不同,应根据具体实验目的选择合适的配方。
通过合理配置和使用PBS缓冲液,可以有效保障实验的稳定性与重复性。在实际操作中,建议根据实验室条件和实验需求灵活调整配方。


